A replicação foi completamente encerrada.
Pela primeira vez, os pesquisadores usaram a edição de genes para eliminar o DNA do HIV dos genomas de três modelos animais diferentes para garantir que a replicação do vírus foi completamente desligada.
A técnica foi demonstrada em animais com HIV agudo e latente, e foi bem sucedida em células imunes humanas transplantadas em ratinhos. A equipe chama-o um “passo significativo” para ensaios clínicos humanos.
Uma equipe liderada por pesquisadores da Temple University e da Universidade de Pittsburgh usou a revolucionária tecnologia de edição de genes, CRISPR/Cas9, para eliminar o DNA do HIV-1 dos genomas de células T de camundongos com vários estágios da doença.
A técnica funciona orientando as proteínas “semelhantes a uma tesoura molecular” para cortar segmentos de DNA dentro de uma célula e levando-as a alterar ou “editar” essas seções de alguma forma.
CRISPR refere-se a uma sequência repetitiva específica de DNA extraído de um procarionte – um organismo unicelular tal como bactérias – que combina com uma enzima guiada por RNA chamada Cas9.
Este ‘RNA guia’ trava-se a enzima Cas9, e juntos eles vão procurar o vírus que coincide com o código que foram programados para encontrar. Uma vez que o localizam, o Cas9 consegue cortá-lo e destruí-lo.
No início de 2016, a equipe demonstrou pela primeira vez como o CRISPR/Cas9 poderia “cortar” o vírus HIV-1 de ratos e camundongos com DNA de HIV-1 inserido no genoma de todos os tecidos de seu corpo.
Desta vez, eles foram capazes de mostrar que a técnica trabalhou em várias formas da doença: uma infecção aguda de EcoHIV, o equivalente de rato humano HIV-1; E uma forma inactivada de HIV-1.
“Nosso novo estudo é mais abrangente, confirmamos os dados de nosso trabalho anterior e melhoramos a eficiência de nossa estratégia de edição genética”, diz Wenhui Hu da Temple University.
“Também mostramos que a estratégia é eficaz em dois modelos de ratos adicionais, um representando infecção aguda em células de rato e o outro representando infecção crônica ou latente em células humanas”.
Em um terceiro modelo animal, os pesquisadores transplantaram células imunes humanas em camundongos antes de infectá-los com um vírus HIV-1 latente.
O fato da técnica parecer funcionar nas formas ativa e dormente da doença é importante, porque mesmo que o vírus não esteja se replicando ativamente nas células imunes do corpo, isso não significa que ele não vai começar de repente em marcha em qualquer momento.
Em oposição à forma aguda da doença, onde o HIV replica ativamente, a forma latente é muito mais difícil de manter no controle das células, porque uma vez que o vírus é inativado pela medicação, ele pode se esconder em reservatórios secretos no sistema imunológico por meses, ou mesmo anos, esperando as condições certas para ressurgir.
É por isso que os pacientes precisam permanecer medicados durante toda a vida – o HIV latente pode se ativar em algumas semanas se o tratamento parar.
Depois de aplicar a técnica CRISPR/Cas9 aos modelos agudos e latentes do vírus, a equipe usou um sistema de imagem recentemente desenvolvido para confirmar que eles tinham cessado com êxito a replicação em ambos.
“O sistema de imagem… aponta a localização espacial e temporal de células infectadas pelo HIV-1 no corpo, permitiu-nos observar a replicação do HIV-1 em tempo real e ver essencialmente reservatórios de HIV-1 em células e tecidos latentemente infectados, ” Diz o membro da equipe, Kamel Khalili da Temple University.
A equipe agora pretende progredir para modelos em primatas da doença, e espero que para ensaios clínicos humanos.
“A próxima etapa seria repetir o estudo em primatas, um modelo animal mais adequado onde a infecção pelo HIV induz a doença, a fim de demonstrar ainda mais a eliminação do DNA do HIV-1 em células T latentemente infectadas e outros locais reservatórios do HIV-1, incluindo células cerebrais“, diz Khalili.
“Nosso objetivo final é um ensaio clínico em pacientes humanos”.
Eles serão confrontados com pelo menos um grande desafio ao longo do caminho – a pesquisa publicada no ano passado descobriu que o HIV poderia outmanoeuvre certas CRISPR/Cas9 técnicas – por isso muito mais verificação e replicação é necessária antes de sabermos se a estratégia pode aguentar a longo prazo.
Mas este é definitivamente um estudo para ficar de olho nos próximos meses.
A pesquisa foi publicada na revista Molecular Therapy.
Fonte: Science Alert
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